时间: 2025-07-26 20:00:42 来源: bbs.chieffocus.com 作者: 娱乐聚焦
在不同浓度英诺克李斯特菌存在的情况下,人工污染法兰克福香肠浸出液经增菌培养后,细胞性单采用平板涂布法均能检测到单核细胞增生李斯特菌。增生珠的制备但随着英诺克李斯特菌污染浓度的李斯链抗提高,单核细胞增生李斯特菌在第一步增菌中的特菌特异体磁终浓度显著下降。当LM/LI=1∶1000时,单核即使经FB和MOPSBLEB培养基二次增菌,细胞性单单核细胞增生李斯特菌的增生珠的制备终浓度也仅能达到103CFU/mL,其生长受到明显的李斯链抗抑制。
采用IBMSPSSStatistics19统计软件对不同磁珠捕获前后获得的特菌特异体磁菌落数进行配对T检验分析(表5)。人工污染样品经磁珠处理后,单核单核细胞增生李斯特菌与英诺克李斯特菌在显色培养基上的细胞性单菌落数比例存在显著性差异(P=0.023<0.05),经scFv-IMBs捕获后显色平板上的增生珠的制备单增李斯特菌的菌落数比例显著提高。经UVM和FB培养基培养后,李斯链抗scFv-IMBs和Dyna-IMBs捕获两种李斯特菌的特菌特异体磁菌落数均无统计学差异(P=0.886和P=0.340),而经MOPS-BLEB培养后,scFv-IMBs的选择性显著高于Dyna-IMBs磁珠(P<0.01)。
以配对T检验比较和分析不同LM/LI比例分别经3种增菌培养基培养,单核细胞增生李斯特菌和英诺克李斯特菌的回收情况见表6。对单核细胞增生李斯特菌的回收进行比较,scFv-IMBs与Dyna-IMBs的回收率相比有极显著性差异(P<0.01)。分别统计每一种培养基经磁珠处理后的回收率,在UVM和FB培养基中scFv-IMBs和Dyna-IMBs的回收率有极显著性差异(P<0.01),但在MOPS-BLEB培养基中两种磁珠之间无显著性差异(P=0.37>0.05)。对英诺克李斯特菌的回收率进行比较,scFv-IMBs在每一种培养基中的回收率均显著低于Dyna-IMBs(P<0.01),scFv-IMBs显示出较好的单核细胞增生李斯特菌特异性,可以在混合体系中显著降低英诺克李斯特菌的干扰。
二次增菌培养后经磁珠处理的培养物在显色平板上划线。结果显示,经scFv-IMBs处理后在FB(LM/LI=1/1000)培养基(LM/LI=1/100和1/1000)的增菌液中,未能获得单核细胞增生李斯特菌的单菌落。而经Dyna-IMBs处理后,LM/LI多数组合中FB和MOPS-BLEB培养基的培养物无法分离获得目标微生物的单菌落,甚至无法检测到单核细胞增生李斯特菌的典型菌落(表7)。scFv-IMBs的高特异性可以较容易的从高浓度英诺克李斯特菌培养体系中分离单核细胞增生李斯特菌。与之相对的,Dyna-IMBs对单核细胞增生李斯特菌的特异性低于scFv-IMBs,在显色培养基上引入了更多的背景干扰菌,尤其是高浓度的英诺克李斯特菌。在LM/LI=1/1000时,仅能通过灵敏度更高的PCR方法检测到目标菌的存在,在选择性平板上也无法有效分离目标菌。采用PCR检测可在除LM/LI=1/100和1/1000外的试验组合中成功检测到目标菌,考虑到免疫磁珠的捕获效率在1.0%~20.0%之间,食品样品中大量的英诺克李斯特菌将对单核细胞增生李斯特菌的检测产生较大的影响。
一般情况下,法兰克福香肠中单核细胞增生李斯特菌的分离率可达2%至8%,是极易引发李斯特菌食物中毒的一种即食食品。但因其组成复杂、基质干扰大,给单核细胞增生李斯特菌的分离带来很大影响。在自然环境中,单核细胞增生李斯特菌常与其它李斯特菌伴生,并易被掩盖。尤其是英诺克李斯特菌的存在显著影响平板分离的效果,即便LM/LI比例在1/1的情况下,仍有很大干扰。
在培养过程中,损伤修复功能被认为有助于提升目标菌的数量,但第2次增菌时间超过24h并不一定会显著提升目标菌数量。经增菌培养后,英诺克李斯特菌的生长速率一般会高于单核细胞增生李斯特菌,导致在选择性琼脂培养基上无法分离。因此,低浓度的单核细胞增生李斯特菌在食品中易被漏检。借助免疫磁珠捕获技术可在选择性平板上更容易地发现目标菌,并获得单菌落。但由于免疫磁珠中抗体制备困难、非特异性结合和低捕获率导致该方法的应用受到限制。有研究显示,Dyna-IMBs在单核细胞增生李斯特菌含量为103CFU/mL的体系中捕获率不足10%,对其它李斯特属细菌也有0.02%~3.42%的非特异性结合。在本研究中,scFv-IMBs对非单核细胞增生李斯特菌的结合率低于0.5%,具有较好的选择特异性。
scFv抗体只有一条轻链和一条重链,与完整抗体相比scFv与抗原的结合力较弱,这可能是导致在增菌培养基中scFv-IMBs捕获效率略低于Dyna-IMBs的原因。但scFv-IMBs可以在高浓度英诺克李斯特菌存在的食品基质中有效分离单核细胞增生李斯特菌,其检测灵敏度可达到1CFU/mL。在选择性平板上经scFv-IMBs捕获处理培养物中单核细胞增生李斯特菌的菌落数比例和分离情况明显优于Dyna-IMBs。
据报道,UVM和FB培养基会降低单核细胞增生李斯特菌表面抗原的表达,而MOPS-BLEB培养基中的BLEB成分可提高单核细胞增生李斯特菌表面抗体的表达。通过在不同培养基中比较免疫磁珠对目标菌的分离率,也表明MOPSBLEB培养基中磁珠捕获效果明显优于UVM和FB培养基。因此,选用免疫磁珠捕获时,应充分考虑增菌培养基对磁珠捕获效果的影响。
本研究制备了一种单核细胞增生李斯特菌特异性的单链抗体片段捕获磁珠(scFv-IMBs),可从较高浓度背景微生物的法兰克福香肠中,尤其是存在英诺克李斯特菌的情况下,有效地富集和分离单核细胞增生李斯特菌,与市售免疫磁珠产品相比具有更好的分离能力,可用于实际样品的检验检测。
声明:本文所用图片、文字来源《中国食品学报》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联
相关链接:李斯特菌,英诺克李斯特菌,FB培养基
《人工污染样品经磁珠处理后》男孩、女孩宝宝名字推荐
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、
·联念z475详细参数,联念z475参数建设
联念z475详细参数,联念z475参数建设http://www.anyangxp.com/zb_users/upload/2024/05/20240523122044171643804496537.jpeg|http://www.anyang...
·PPG工业7.5亿美元出售平板玻璃业务,行业资讯
PPG工业7.5亿美元出售平板玻璃业务,行业资讯美国涂料巨头PPG工业公司7月21日宣布,其已经达成了一份较终协议,以约7.5亿美元的现金将旗下平板玻璃制造和玻璃涂料业务,售予墨西哥玻璃制造企业VitroS.A.B.deC.V.。预计此次交易将于2 ...
·品味质感生活 LEVI’S 日本制系列来了
品味质感生活 LEVI’S 日本制系列来了东西方审美的交融在现代时尚领域有着诸多粉丝,尤其是美式风格的品牌如果加入东方气质的点缀往往变得更令人心驰神往。近日李维斯日本制系列在中国上海开启了系列活动,让人体验现代东西方审美融合的同时也感受到现代 ...
·彰显我国认证工作国际影响力 CCAA常务副会长兼秘书长黄继先担任新一届IPC副主席
彰显我国认证工作国际影响力 CCAA常务副会长兼秘书长黄继先担任新一届IPC副主席中国消费者报北京讯记者任震宇)近日,国际人员认证协会 (IPC) 2022年全体大会暨执行委员会会议以网络会议方式召开。大会提议中国认证认可协会CCAA)常务副会长兼秘书长黄继先先生任新一届IPC副主 ...
·治愈系的小文章下情商问复心灵鸡汤深夜压抑到哭的案牍
治愈系的小文章下情商问复心灵鸡汤深夜压抑到哭的案牍http://www.hwenz.com/pic/治愈系的小文章下情商问复心灵鸡汤深夜压抑到哭的案牍.jpg...
·今年上半年河北平板玻璃产量同比下降,行业资讯
今年上半年河北平板玻璃产量同比下降,行业资讯今年上半年,河北省建材工业生产和销售基本保持平稳增长,水泥、建筑陶瓷等主要产品产量增速较快,产品价格有所回升,行业经济效益现好转趋势。据记者了解,河北省水泥产量增长较快,平板玻璃产量同比下降。1~6月 ...
·福建漳州制定工作指引 落实食品安全主体责任
福建漳州制定工作指引 落实食品安全主体责任中国消费者报福州讯记者张文章)为贯彻落实《企业落实食品安全主体责任监督管理规定》,督促企业落实食品安全主体责任,强化食品安全风险防控动态管理,12月初,福建省漳州市市场监管局制定《漳州市食品经营企业食 ...
·Steiff春夏系列 展现时髦气质 层次感升级
Steiff春夏系列 展现时髦气质 层次感升级温暖的季节就要穿上舒爽的服饰,T恤的简洁轻便给了闲暇的日常休闲的体验,宽松不紧绷,自在日常简单休闲。作为小朋友们喜欢的单品之一,连体服一直都是简便得体,舒适休闲的设计,单穿亦或者叠搭都很上镜,尤其是在 ...
·“指定管辖格式条款”系列报道|“指定仲裁”“指定管辖”成消费者维权障碍,专家教你破解技巧!
“指定管辖格式条款”系列报道|“指定仲裁”“指定管辖”成消费者维权障碍,专家教你破解技巧!中国消费者报报道记者任震宇)在前期报道中,《中国消费者报》梳理了30多家企业网站、APP“用户协议”中的“指定管辖”格式条款,发现其都规定了发生消费争议时具有管辖权的法院或仲裁委),且指定的法院仲裁委 ...
·玻璃企业为金九银十烘托氛围,行业资讯
玻璃企业为金九银十烘托氛围,行业资讯上周7.25)以来,风向标沙河地区玻璃价格持续上调,各企业陆续完成了1-2轮调价,上涨主因:1、前期大范围降水影响了玻璃的需求和运输,月底降雨逐步结束,购销恢复反弹。2、已是八月份,企业对金九银十的预 ...
Under Armour宣布将复刻库里的经典战靴Under Armour Curry 2
友情链接